Производство лечебной антирабической сыворотки

Производство лечебной антирабической сыворотки

Производство лечебной антирабической сыворотки

Метод Пастеровского института

В Пастеровском институте лечебную антирабическую сыворотку готовят путем иммунизации лошадей или мулов пастеровским штаммом фиксированного вируса бешенства. Иммунизацию начинают инактивированной вакциной типа Fermi, инъекции которой продолжают на протяжении двух месяцев. Затем следует ряд инъекций возрастающих доз живого вируса. Все инъекции производятся подкожно. Если объем вводимого материала становится слишком большим для введения в одну точку, то его делят на несколько порций и вводят в разные участки тела животного.

Животных следует отбирать очень тщательно, так как, даже если животных берут из одной разводки, пригодность того или иного из них как донора сыворотки варьирует в зависимости от возраста, общего состояния, состояния питания и анамнеза. Время от времени у иммунизируемых животных берут пробу сыворотки и определяют титр антител. Особи, реакция которых на антиген оказывается неадекватной, исключаются и для дальнейшей иммунизации оставляют только тех животных, от которых можно получить сыворотку высокого титра.

Иммунизацию производят по следующей схеме:
С 1-го дня по 60-й: 20 мл вакцины типа Fermi через день (30 инъекций). С 61-го дня по 72-й: 4 инъекции но lU мозга кролика, зараженного фиксированным вирусом, с интервалами в 3 дня. С 73-го дня по 88-й: 4 инъекции по V2 мозга кролика, зараженного фиксированным вирусом, с интервалами в 4 дня. С 89-го дня по 98-й: 2 инъекции по целому мозгу кролика, зараженного фиксированным вирусом, с интервалом в 5 дней. 106-й день: первое кровопускание. 136-й день: одна инъекция целого мозга кролика, зараженного фиксированным вирусом. 144-й день: второе кровопускание.

Таким образом, период иммунизации длится 98 дней, а первое, кровопускание производится спустя 8 дней. Ревакцинация производится спустя 30 дней; через 8 дней после нее делают второе кровопускание. В дальнейшем бустерную инъекцию антигена и кровопускания производят с теми же интервалами; только на 2 месяца в году схема прерывается (период отдыха).

Метод Института сывороток и вакцин, Сиена

Согласно описанию d’Antona и Falchetti, приведенному в первом издании настоящей монографии, метод Сиенского института также предусматривает использование лошадей для приготовления гипериммунной сыворотки. Mirchamsy (1963) из Института Razi (Гессарек, Иран) несколько модифицировал данный метод для иммунизации взрослых мулов. Вакцину, которую применяет Mirchamsy, готовят из мозга овец, зараженных путем интрацеребрального введения фиксированного вируса Sassari. Эта вакцина представляет собой 5% суспензию мозговой ткани, содержащую 0,5 % фенола и инактивированную в течение 24—48 часов при 37°. Мулов, используемых в качестве доноров сыворотки, одновременно иммунизируют против столбняка несколькими инъекциями столбнячного анатоксина, адсорбированного на фосфате алюминия (РАТТ).

Иммунизацию производят по следующей схеме:
1-й день: 20 мл фенольной вакцины +10 мл РАТТ Со 2-го дня по 20-й. 20 мл фенольной вакцины ежедневно (19 инъекций) 21-й день. 30 мл фенольной вакцины +25 мл РАТТ С 22-го по 40-й день. 30 мл фенольной вакцины ежедневно (19 инъекций). 41-й день. 45 мл фенольной вакцины+40 мл РАТТ. С 42-го по 56-й день. 45 мл фенольной вакцины ежедневно (15 инъекций) С 57-го по 115-й день: период отдыха (60 дней) 116-й дены 30 мл фенольной вакцины+30 мл РАТТ Со 117-го по 126 день: 30 мл фенольной вакцины ежедневно (10 инъекций) 127 -й день. 45 мл фенольной вакцина+45 мл РАТТ Со 128-го по 136-й день. 45 мл фенольной вакцины ежедневно (9 инъекций) 137- й день. 30 мл 5% суспензии живого вируса (фиксированный штамм Sassari) + 60 мл РАТТ. Со 138-го по 144-й день. 30 мл 5% суспензии живого вируса Sassari ежедневно (6 инъекций) 156-й день: первое кровопускание.

Ускоренный метод

Fuenzalida и Palacios (1964) разработали ускоренный метод гипериммунизации лошадей. Сначала производят ряд подкожных инъекций вакцины в возрастающих концентрациях, а затем одновременно вводят подкожно, внутрибрюшинно и внутрикожно чистый вирус, суспендированный в адъюванте Freund без микобактерий.

Кровопускание производят через 20 дней после завершения иммунизации.

Схема иммунизации в данном случае следующая:
1-й день: 40 мл 1% инактивированной вакцины подкожно. 7-й день: 40 мл 2% инактивированной вакцины подкожно. 14-й день: 40 мл 2% инактивированной вакцины подкожно. 34-й день: 3 инъекции 8% суспензии живого вируса (мозговая ткань) в адъюванте Freund — 5 мл внутрибрюшинно, 4 мл подкожно и 1 мл внутрикожно. 41-й день: 3 инъекции 16% суспензии живого вируса в адъюванте Freund — 5 мл внутрибрюшинно, 4 мл подкожно, 1 мл внутрикожно. 48-й день: 3 инъекции 20% суспензии живого вируса в адъюванте Freund — 8 мл внутрибрюшинно, 6 мл подкожно, 1 мл внутрикожно. 68-й день: кровопускание.

Вакцину, применяемую на начальных этапах иммунизации, готовят по методу, ранее описанному Fuenzalida и Palacios (1955). Мышей-сосунков заражают фиксированным вирусом бешенства и приготовленную из ткани их мозга вакцину инактивируют ультрафиолетовыми лучами. Суспензию живого вируса готовят также из мозга мышей-сосунков с добавлением адъюванта Freund без микобактерий.

Этот быстрый метод обеспечивает вполне удовлетворительную иммунизацию; по данным Fuenzalida и Palacios, с его помощью удается добиться такого же титра нейтрализующих антител, как и при иммунизации другими методами.

Источник: UaPages.com Украинские Страницы

Прокомментировать

Вы должны войти чтобы оставить комментарий.